無血清細胞凍存液

推薦理由：

• 適用于哺乳動物細胞的凍存，細胞復蘇后回收率高，可保持高活性及快速增殖能力，不影響細胞功能；

• 操作簡單，無需程序降溫，可直接凍存于-80℃冰箱，長期保存；

• 成分明確，不含動物源成分，安全性高；

• 即用即取，無需配制；

• 質(zhì)量穩(wěn)定可靠，批間次差異�。�

型號和規(guī)格

LC1601（100ml/瓶），瓶口密封包裝。

用途

用于-80℃、-196℃冷凍保存常用細胞系，不含蛋白質(zhì)和任何動物源成分。

性狀

含 10%DMSO。本品為無色透明澄清溶液，有粘性。無細菌、真菌、支原體，pH=7.2~7.8，內(nèi)毒素< 1 EU/ml。

運輸和儲存

2~8℃低溫儲存和運輸�？煞盅b后于-20℃冷凍保存，使用前解凍并充分混勻。本品自生產(chǎn)日期起，兩年內(nèi)有效。

使用方法

準備細胞

1. 檢查并確認細胞沒有真菌、細菌、支原體污染。

2. 凍存前的細胞處于增殖旺盛的對數(shù)生長期最佳。

3. 計數(shù)待凍存的細胞數(shù)量。懸浮細胞應 180g 離心 5~10min 后除去培養(yǎng)基，貼壁細胞應消化后計數(shù)，再 180g 離心除去培養(yǎng)基以獲得細胞沉淀。

細胞凍存

4. 首先確定細胞適宜的凍存密度和體積，計算應使用的LC1601 凍存液體積。

注：可使用的凍存密度為 1~10×106/ml，推薦凍存密度為 2~5×106/ml。凍存體積為 0.5~1ml/管。

5. 吸取適量 LC1601 重懸細胞，使用前產(chǎn)品應當 2~8℃預冷。細胞重懸后應當立即分裝至細胞凍存管。

6. 經(jīng)凍存液重懸后的細胞不能在室溫或 2~8℃靜置超過 10 min 以上，應當盡快將凍存管移入-80℃低溫冰箱，不采取任何程序降溫措施或使用程序降溫裝置。如果無法立即移入-80℃低溫冰箱，至少應當先移入低于 0℃環(huán)境中（如-20℃冰箱）短暫存放 10 min 左右， 同樣不采取程序降溫。

7.-80℃冰箱過夜后的凍存管，若長期儲存，可移入液氮罐中保存。若短期取用，可于-80℃短期保存數(shù)月，保存時間、效果因細胞類型而不同。

注：1.初次使用本產(chǎn)品凍存的細胞類型，應測試保存時間和效果后再使用。

2.參考——C3A 使用LC1601 凍存液，以 1×106/ml/管于-80℃保存 12 個月后復蘇，即時活率>90%。

細胞復蘇

8. 先準備室溫或 37℃預溫好的完全培養(yǎng)基，其體積為凍存液體積的 9 倍。

9.取出液氮或-80℃中的凍存管，置于 37℃水浴并不斷輕搖。待剩余 1 粒米大小的冰塊時，迅速移出水浴。

10. 立即吸取凍存液至完全培養(yǎng)基中，輕柔吹打 3~5 次混勻。然后，180g 離心 5~10 分鐘， 獲得細胞沉淀備用。

安全性說明

本產(chǎn)品可用于科學研究，尚未經(jīng)過臨床驗證，不可用于治療用途。