精子DNA碎片染色試劑盒（SCD染色法）

·產(chǎn)品說明：

　　【品 名】

　　精子權(quán)威五聯(lián)檢：精子DNA碎片染色試劑盒(SCD染色法)

　　【試劑特點(diǎn)】無須特殊儀器，簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確。

　　【檢驗(yàn)原理】

　　將待測(cè)精液標(biāo)本混勻于凝膠中，通過酸變性使精子頭部完整的雙鏈DNA變性為單鏈DNA，DNA完整的精子在經(jīng)過變性和去核蛋白后經(jīng)染色可擴(kuò)散形成特征性的光暈，而DNA不完整的精子不會(huì)產(chǎn)生這種特征性的光暈。醫(yī)生根據(jù)顯微鏡觀察光暈的有無和大小判斷精子的DNA完整程度。DNA完整程度指標(biāo)可作為不育、反復(fù)流產(chǎn)以及胚胎異常病因?qū)W診斷的一種可靠的精子質(zhì)量評(píng)價(jià)參照指標(biāo)。

　　【樣本要求】液化后的新鮮精液或貯存于-20℃的精液標(biāo)本。

　　【操作方法】

　　1、將易熔凝膠管置80℃孵育20min，待完全溶化后，將易熔凝膠管轉(zhuǎn)移至37℃恒溫水浴箱中孵育備用。(將80℃轉(zhuǎn)移到37℃需至少平衡5min方可使用)

　　2、取100ul液化精液標(biāo)本與200—300ul稀釋液充分混勻，再?gòu)闹腥?0ul處理過的精液加入易熔凝膠管中充分混勻，置37℃孵育備用。

　　3、吸取30ul上述配置的精子凝膠混合液，滴在包被載玻片上，立即蓋上蓋玻片，在4℃下放置5 min。

　　4、以“側(cè)抽”的方式小心移除蓋玻片，在室溫條件下滴加1—2ml變性液變性7 min后，棄去變性液。滴加1—2ml裂解液反應(yīng)20min。

　　5、載玻片水平放置于純化水中3—5 min，其間換水1—2次。

　　6、將載玻片分別置于70%、90%和100%的乙醇中脫水2 min，取出，空氣自然干燥。

　　7、加入染色液A 10滴，放置1-2min，再緩慢加染色液B 20滴，以吸耳球吹打混勻染液，染色15min后，用流水緩緩沖洗，自然干燥或吹干，在普通光鏡下觀察結(jié)果。

　　注意：所有操作過程中，均要求載玻片處于水平狀態(tài)。

　　【染色結(jié)果】

　　DNA完整無碎片的精子形成大和中光暈；DNA斷裂為碎片的精子形成小和無光暈；DNA不完整的精子不會(huì)產(chǎn)生光暈。

　　見下圖：圖①為精子DNA碎片判定標(biāo)準(zhǔn)，其中A為精子頭部最小直徑，B為單側(cè)光暈厚度，當(dāng)B≤A(即光暈太小或無光暈)則表明精子存在DNA碎片。②③為DNA完整的精子，④⑤為存在DNA碎片的精子。

　　【注意事項(xiàng)】

　　1、操作過程對(duì)實(shí)驗(yàn)條件要求較高，各個(gè)環(huán)節(jié)需準(zhǔn)確控制。

　　2、檢測(cè)樣本為液化后的新鮮精液或貯存于-20℃的精液標(biāo)本，過期或未按貯存要求存放的標(biāo)本不能用于檢測(cè)。

　　3、精液中圓形的各類細(xì)胞經(jīng)過變性后，形態(tài)變化較大，須注意與精子相鑒別，不要將其計(jì)入精子之列。

　　4、每次試劑使用后，請(qǐng)迅速蓋好密封保存，以免揮發(fā)及影響效果。

　　5、使用前應(yīng)詳細(xì)閱讀使用說明書及產(chǎn)品包裝標(biāo)識(shí)，在有效期內(nèi)使用，并做好個(gè)人衛(wèi)生防護(hù)，若變性液與裂解液不慎與皮膚接觸或?yàn)R入眼睛，立即用大量清水沖洗并及時(shí)診治。

　　6、生產(chǎn)批號(hào)、有效期見外包裝。

　　7、染色廢液、廢瓶或使用后標(biāo)本按醫(yī)療廢棄物處理。

　　【基本信息】

　　存儲(chǔ)條件及有效期：試劑盒于2-8℃避光保存，有效期12個(gè)月。

• 聯(lián)系方式
• 生產(chǎn)企業(yè)：

  三明市和眾生物技術(shù)有限公司

• 聯(lián) 系 人：陳先生
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